Новость от 20.11.2015

Предрасположенность к аллергенам


Определение наследственной предрасположенности к сенсибилизации производственными аллергенами является актуальной задачей, поскольку в России много производств с использованием органических и неорганических аллергенов. Во многих странах ведутся научные исследования и разработки, в том числе в нашей стране.

Так, известен способ выявления наследственной предрасположенности к сенсибилизации, включающий забор венозной крови, выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами. Суть его в определении нуклеотидной последовательности и, на основании этого, в выявлении полиморфных вариантов гена ФНОα в полиморфном положении G308A, -590С>Т гена ИЛ4 и 431G>A гена ИЛ13. Однакоэтот способ имеет специфическую особенность, так как определение полиморфного варианта 431G>A гена ИЛ 13 для выявления наследственной предрасположенности к сенсибилизации этноспецифично в отношении  некоторых популяций(в частности татар). Это существенно снижает возможность выявления наследственной предрасположенности к сенсибилизации у лиц различных популяционных групп, работающих с веществами сенсибилизирующего действия.

В октябре с.г. Научно-исследовательский институт медицины труда запатентовал новый способ. Изобретение предназначено для определения наследственной предрасположенности к сенсибилизации производственными аллергенами. Согласно изобретению, осуществляют забор венозной крови, выделение ДНК, проведение ПЦР со специфическими праймерами, определение нуклеотидной последовательности генов ФНОα, ИЛ 4 и ИЛ 10. При обнаружении генотипа АА гена ФНОα в полиморфном положении G308A, генотипа ТТ ИЛ 4 С589Т, генотипа ТТ ИЛ 10 Т819С, генотипа АА ИЛ 10 A1082G или генотипа АА ФНОα G308A, генотипа ТТ ИЛ 4 С589Т, генотипа АА ИЛ 10 A1082G определяют наследственную предрасположенность к сенсибилизации производственными аллергенами.

Изобретение позволяет выявлять предрасположенных к развитию профессиональных аллергодерматозов лиц различных популяционных групп в процессе предварительных или периодических медицинских осмотров большого количества работающих или поступающих на работу на аллергоопасные производства.

Предлагаемый способ может быть применен в клинических, биохимических, молекулярно-генетических лабораториях, укомплектованных широко используемым оборудованием, выпускаемым отечественной или зарубежной промышленностью. Заявленный способ осуществляют следующим образом. У пациентов осуществляют забор венозной крови. Из 100 мкл цельной крови выделяют ДНК с использованием комплекта для выделения «ДНК-сорб-В» (ТУ9398-071-01897593-2008). Далее проводят полимеразную цепную реакцию со специфическимипраймерами и определяют нуклеотидную последовательность. Для этого из полученного препарата ДНК объемом 50 мкл готовят серии разведений в ТЕ-буфере до конечной концентрации 1–3 нг/мкл, добавляют 10 мг конечного раствора ДНК в пробирку для осуществления генотипирования ИЛ4 С589Т, ИЛ10 Т819С, ИЛ10 A1082G, ФНОα G308A с помощью наборов, например, фирмы «Литех», Россия. Объем амплификационной смеси – 25 мкл. После проведения полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами осуществляют анализ продуктов реакции в 3%-полиакриламидном геле с последующей окраской этидиумбромидом и визуализацией в проходящем УФ-свете. При этом определяют нуклеотидную последовательность гена ФНОα в полиморфном положении G308A, гена ИЛ4 в полиморфном положении С589Т, гена ИЛ10 в полиморфных положенияхТ819С и A1082G. При обнаружении гомозиготных вариантов АА генотипа гена ФНОα G308A, ТТ генотипа гена ИЛ4 С589Т, ТТ генотипа гена ИЛ10 Т819С, АА генотипа гена ИЛ10 A1082G или АА генотипа гена ФНОα G308A, ТТ генотипа гена ИЛ4 С589Т, АА генотипа гена ИЛ10 A1082G определяют наследственную предрасположенность к сенсибилизации производственными аллергенами у лиц различных популяционных групп.

Например, больной П. работал оператором на заводе в контакте с эпоксидной смолой. Через год после начала работы по результатам обследования был поставлен диагноз профессиональная экзема верхних конечностей. С его слов, имеет аллергическую реакцию на новокаин и эритромицин в виде сыпи. По результатам клинико-лабораторных исследований: эозинофилы – 15% (норма до 5%), эозинофильный катионный белок – 27 нг/мл (норма до 10 нг/мл), иммуноглобулин Е– 204 МЕ/мл (норма до 120 МЕ/мл). В соответствии с предлагаемым способом кровь исследовали по вышеуказанной процедуре. При анализе результатов были выявлены полиморфные гомозиготные варианты ИЛ4 С589Т – ТТ, ИЛ10 Т819С – ТТ и ФНОα G308A – АА, ИЛ10 A1082G – АА, что свидетельствует о нарушении экспрессии генов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, следствием чего явилось развитие наследственной предрасположенности к сенсибилизации производственными аллергенами.

 

Патент РФ 2564914 (октябрь 2015)


Источник: http://минобрнауки.рф/новости/6867

Вернуться назад